微信公众号

扫描二维码
医学+优质原创科普

微信小程序

微信扫码
在手机上浏览本网站

血清补体测定

概述

血清补体测定(sera complement assay)指测定血清中各补体成分及总补体含量的实验,是测定机体免疫功能的一种方法。补体是广泛分布于血浆中具有酶活性的一组不耐热的球蛋白,约占球蛋白的10%,具有溶解靶细胞、促进吞噬、参与炎症反应等功能,同时补体还在免疫调节、清除免疫复合物、稳定机体内环境、参与变态反应及自身免疫性疾病起关键性作用。总补体活性和单个补体成分含量的变化,对某些疾病的诊断和疗效观察具有重要意义。

原理

评估补体系统的常规检测包括CH50和C3、C4、B因子、C1-INH等。
1. 总补体活性
根据补体能使兔抗羊红细胞抗体(溶血素)致敏的羊红细胞发生溶血,其溶血程度与总补体活性有关。总补体活性测定主要反映补体(C1~C9)经传统途径活化后的活性。
2. 血清补体C3
C3在补体经典激活途径与旁路激活途径中均发挥重要作用。
(1)单向免疫扩散法:将含有抗补体抗体的琼脂铺在玻璃板上,然后打孔,加抗原(补体)。在合适的温度、湿度环境中,经过一定时间扩散,抗原与混匀在琼脂中的抗体在比例合适处可形成清晰的沉淀环。沉淀环直径大小与抗原的浓度在一定范围内成正比。用标准抗原制成标准曲线,可查出被测抗原的含量。
(2)火箭免疫电泳法:当抗原与凝胶中抗体在电场作用下移动,逐渐形成梯度浓度,在抗原抗体比例适当时形成不溶性免疫复合物沉淀线而沉淀,随着抗原量的减少,沉淀带越来越窄,形成火箭峰样沉淀带,峰形高低与抗原量成正比。以峰高为纵坐标,浓度为横坐标(对数坐标)绘制标准曲线,可求出待检样品内抗原浓度。
3. 血清补体C4
抗原在含有一定量的单一抗体琼脂中进行电泳,在电场力的作用下,两者比例合适时形成沉淀峰类似火箭而得名。沉淀峰的高度与抗原浓度成正比,与抗体浓度成反比,因此可以作为抗原定量试验。主要反映补体的经典激活途径。

临床意义

1. C3、C4和(或)CH50均降低,提示激活了补体的经典途径;C3低伴有正常的C4常提示激活了旁路途径。
2. 各种肾病时补体变化可不同,急性链球菌感染毛细血管内增生性肾小球肾炎,约85%患者在炎症早期血清补体多明显下降,以CH50和C3下降最显著,C4可正常,如急性链球菌感染后急性肾炎无并发症,C3在8?12周恢复正常,否则可能转为慢性肾炎膜增生性肾小球肾炎,由于患者血清内存在C3致肾炎因子 (C3NeF),激活了旁路途径,引起C3持续而明显降低。此外,约78%狼疮性肾炎以及肾移植排异反应,C3、C4及CH50通常降低,病情稳定后可恢复正常;膜性肾病IgA肾病、微小病变病,C3大多在正常范围内。

正常参考范围

1. 总补体活性
将新鲜的受检血清作一系列稀释后,分别加入抗体致敏绵羊红细胞,经过一定时间反应,根据溶血程度判断受检血清中的总补体活性。现在常用50%溶血活性测定,即CH50。健康人正常参考值为50~100U/mL。
2. 血清补体C3
正常参考值:①单向免疫扩散法为0.80~1.20g/L。②火箭免疫电泳法正常参考值火箭免疫电泳法为0.9879~1.4559g/L。
3. 血清补体C4
正常参考值为130~370mg/L。

注意事项

1. 受检血清必须新鲜,如放置室温2h以上,会使补体活性下降。
2. 补体的溶血活性受多种因素的影响,如绵羊红细胞浓度及致敏抗体的量等。在进行检测时,需对反应的各个环节作严格控制。
3. CH50不能测定补体蛋白的绝对值,也不能测定备解素系统中的成分。

温馨提示: 以上内容仅供参考,具体诊疗请遵循医生指导。 百科名医版权所有,未经许可不得转载。
相关视频
更多
相关文章
更多
概述
原理
临床意义
正常参考范围
注意事项